籼型杂交水稻“三系”原种生产技术操作规程

1 范圍
　　本規程規定了秈型雜交水稻“三系”原種生產中單株選擇、株行（系）鑒定、原種生產操作技術規范。
　　本規程適用于秈型雜交水稻野敗型不育系和不育性類似野敗型不育系的新質源類型的不育系、保持系、恢復系（以下簡稱為“三系”）原種生產。

        2 引用標準
　　下列標準所包含的條文，通過在本標準中引用而構成為本標準的條文。本標準出版時，所示版本均為有效。所有標準都會被修訂，使用本標準的各方應探討使用下列標準最新版本的可能性。
　　GB/T 3543.1～3543.7—1995 農作物種子檢驗規程
　　GB 4404.1—1996 糧食作物種子禾谷類

       3 定義
　　本標準采用下列定義。
       3.1 不育系　male sterile line
　　雌蕊正常而雄蕊花粉敗育，不能自交結實，育性受遺傳基因控制。如具有野生稻雄性不育細胞質的不育系，稱為野敗型不育系，通常用A表示。
       3.2 保持系　maintenance line
　　雌雄蕊發育正常，能自交結實，給不育系授粉后能夠結實，但其后代仍然具有雄性不育特性。通常用B表示。
       3.3 恢復系　restorer line
　　雌雄蕊發育正常，授粉不育系所產生的雜種一代育性恢復正常，能自交結實，具有較強的優勢。通常用R表示。
       3.4 繁殖　propagation
　　不育系由保持系授粉結實而繁衍種子。保持系和恢復系自交結實，統稱為“三系”繁殖。
        3.5 制種　seed production
　　用恢復系給不育系授粉結實，得到育性正常且具雜種優勢的雜交水稻種子，稱為制種。

         4 “三系”原種生產
         4.1 生產方法
　　  采用改良混合選擇法，即單株選擇（選種區）、株行比較（株行圃）、株系鑒定（株系圃）、混優系繁殖（原種圃），簡稱為“一選三圃法”。
         4.2 基地選擇
　　  要選擇隔離條件優越、無檢疫性病蟲害、土壤肥沃、旱澇保收、集中連片的田塊。
         4.3 親本選擇原則
　　在育性、保持力、恢復度穩定的基礎上，以典型性、一致性為選擇依據的重點。以田間選擇為主，室內考種為輔，并綜合評定決選。
        4.4 隔離
　　不育系與異品種最好自然隔離。如為時間隔離，花期錯開25d（天）以上。如為空間隔離，距離700m以上；恢復系、保持系的三圃與異品種距離不少于20m。對于柱頭外露率高的保持系，從單株選擇到原種圃，都要嚴格隔離。并嚴禁周圍（500m 以內）種植粳、糯品種。
       4.5 保持系原種生產
       4.5.1 單株選擇（選種區）
       4.5.1.1 種子來源
　　本地原種或引進外地原種。
       4.5.1.2 田間種植
　　選種區333m2（0.5畝），稀播勻播，單株稀植，采用優良栽培技術。
       4.5.1.3 選擇標準
　　當選單株下列性狀必須符合原品種特征特性：
　　a）株、葉、穗、粒四型、生育期和葉片數；
　　b）分蘗性、長勢、長相；
　　c）抗逆性、結實率；
　　d）花藥大小、花絲長短、花粉量多少，開花散粉習性，鏡檢敗育情況。
       4.5.1.4 選擇時期和數量
　　分4次進行。分蘗期以株型、葉鞘顏色、分蘗多少為目標，初選500株（插桿為記）。抽穗期以主穗分蘗穗抽穗快慢和一致性，選留300株。成熟期以穗長、結實率、粒型、成熟度整齊一致性和抗病性，定選200株。然后，室內考種，綜合評選100株，將當選的單株單收、編號登記、裝袋、保存。
       4.5.2 株行圃
       4.5.2.1 種子來源
　　上季當選的單株。
       4.5.2.2 田間設計
　　取各單株（含對照采用同品種原種）的等量種子，同時分別播種育秧，各單株播種面積一致。本田分行單本插植，按編號順序排列，不設重復，逢十設對照，行區間留走道。
       4.5.2.3 觀察記載
　　對群體的典型性、豐產性、一致性、抗逆性和生育期、開花習性進行觀察記載。詳見附錄A（標準的附錄）。
　　每株行同位定點觀察10株，標記葉齡，對各株行的特征特性分期考查。分蘗期看繁茂性和一致性、葉鞘的顏色、分蘗力的強弱；抽穗期看抽穗快慢，觀察劍葉的長寬、花藥大小和散粉情況；成熟期看株高整齊度，籽粒形狀，芒的有無，稃尖顏色、成穗數、結實率和籽粒飽滿度等。成熟后全部取回按單株考種項目，考查其經濟性狀。
       4.5.2.4 取舍原則
　　a）凡株、葉、穗、粒四型、主莖葉片數、芒的有無、稃尖、葉鞘顏色等不符合原品種特征的株行，全區淘汰，出穗前一個株行發現一株變異株，全行淘汰；
　　b）田間淘汰長勢長相不一致、生長不整齊的株行，抽穗期、成熟期超過± 1d（天），予以淘汰；
　　c）經濟性狀取舍標準同4.5.1，選留標準略高于平均數，各株行產量不低于鄰近對照。
　　d）綜合評選，株行圃當選率一般為30％。
       4.5.2.5 收獲儲藏
　　當選株行單收、單脫、單曬、單儲、編號登記。
       4.5.3 株系圃
       4.5.3.1 種子來源
　　上季當選的株行種子。
       4.5.3.2 田間設計
　　本田采用順序排列，分系插等量面積，以同品種原種插植一定面積作對照，剔除誤選的變異。
        4.5.3.3 觀察記載和選擇標準
　　同4.5.2。定點觀察10株，各生育階段增記田間雜株率，每系有一株以上雜株，淘汰全系。
        4.5.3.4 綜合評選
　　通過田間目測與產量測定，綜合評選優良株系，當選率50％。當選株系混收，一部分用于生產，多余的種子干儲冷藏，以后連用。
       4.5.4 原種圃
       4.5.4.1 種子來源
　　上年當選的株系種子。
       4.5.4.2 田間設計
　　采取單本插栽，精細管理，提高繁殖系數。
       4.5.4.3 定原種
　　符合GB 4404.1原種標準的種子定為原種。
       4.6 恢復系原種生產
       4.6.1 種子來源
　　從原種圃或純度較高的田里選，或從育種單位（異地）引進純度較高的種子。
      4.6.2 三圃的設置、種植方法、選擇標準同4.5。
　　典型性：主要看株、葉、穗、粒四型和莖葉色澤、主莖葉片數，選擇具有典型性、一致性，經鏡檢無敗育花粉的單株。
       4.6.3 測優鑒定
　　每一株行取2個單株用同一個不育系原種3～5個單株測交，收種作測優鑒定。綜合評選典型性好、恢復度80％以上、恢復株率99.9％、抗逆性好、產量高于對照的恢復系，株行當選率30％～50％，株系當選率50％～70％。
       4.6.4 株行、株系圃觀察記載方法、標準、項目同4.5。
       4.6.5 定原種
　　株系的混優種子結合優勢鑒定，取配合力優勢強的株系混合收貯，根據需要設置原種圃。
　　符合GB 4404.1原種標準的種子定為原種。種子除用于制種外，多余種子干儲冷藏，以后連用。
       4.7 不育系原種生產
       4.7.1 單株選種區
       4.7.1.1 種子來源
　　用本地原種或從外地引進原種，保持系用原種或株系混優種子。
       4.7.1.2 種植方法
　　選種區單本稀植，父母本行比為1∶2，精細培管，不割葉、不剝苞、不噴生長激素，抽穗揚花時趕粉。
       4.7.1.3 選擇標準
　　當選不育系單株選擇標準在與相應保持系單株選擇標準相同的前提下，以原不育系的不育性、開花習性和包頸為選擇依據的重點。
       4.7.1.4 育性檢驗
　　始穗期對初選合格單株逐株鏡檢，根據附錄A（標準的附錄）的標準和方法，淘汰有可育花粉及染敗的單株。
       4.7.1.5 開花習性
　　詳見附錄A（標準的附錄），根據不育系原型的開花習性而定。
       4.7.1.6 考查主穗、分蘗穗的包頸長度
       4.7.1.7 選擇時期和數量
　　選擇步驟同4.5.1，注意始穗期觀察全區每株花藥，拔除有粉型的單株，再根據鏡檢復選。田間選擇數量不少于200株，決選不少于50株。
       4.7.1.8 將當選不育系單株單收、單脫、單儲、登記編號備用。
       4.7.2 株行圃
       4.7.2.1 種子來源
　　用上年當選的單株，父本以混優的保持系或用干儲冷藏的保持系種子。
       4.7.2.2 種植方式
　　按父母本播差期分別播種育秧，分行種植，父母本行比為1∶3，父母本間距為20～25cm，區間走道50cm，順序排列，不設重復和對照，不用攻粒措施，進行典型性比較，但必須及時趕粉，盡量提高結實率。
       4.7.2.3 觀察記載及選擇標準
　　同4.5.2。每株行定點觀察10株記載，用眾數選擇方法評選，同時，每株行抽插10株不育系于另一自然隔離或屏障隔離區，不套袋，記載結實粒，當選的各株行，取樣10株進行室內考種，重點考查異交結實率等經濟性狀。
       4.7.2.4 育性標準及育性檢驗
　　同4.7.1。育性檢驗采取目測與鏡檢相結合的方法，在花期每株行鏡檢20％的不育系（株）率，并逐株目測花粉形態和顏色，出現一株變異株，即淘汰全行。
       4.7.2.5 開花習性
　　同4.7.1。
       4.7.2.6 株行決選
　　在定點觀察、育性鑒定和鏡檢等項目的基礎上重點選典型性、一致性、異交結實率高的株行。株行當選率30％。
       4.7.2.7 收獲
　　當選株行分別單收、單脫、單藏、編號登記保存。授粉結束后，先割保持系，防雜保純。
       4.7.3 株系圃
       4.7.3.1 種子來源
　　上年當選的株行不育系種子，父本用干儲的混優保持系或相同的株行圃種子。
        4.7.3.2 田間設計
　　每株系（含對照采用同品種的原種）插等量面積。順序分系栽插，父母本行比為1∶4，逢10設對照，周圍插父本作保護行。
       4.7.3.2.1 觀察記載項目、標準
　　同4.7.2。分系五點取樣20株鏡檢花粉。增記田間純度，調查記載雜株率。發現變異株的淘汰全部株系。
       4.7.3.2.2 葉齡記載和測產
　　各株系同位定點10株記載葉齡，用眾數選擇法評選。在同樣栽培條件下，再次比較鑒定其優劣，進行測產。
       4.7.3.3 育性鑒定
　　同4.7.2。每株系再抽樣20株種植自然隔離區（或盆栽隔離）觀察自交結實情況，作為育性取舍依據。
       4.7.3.4 當選標準
　　根據觀察記載、目測、鏡檢、測產情況，綜合評選優系，當選率50％。
       4.7.3.5 收割
　　成熟時先混收田間淘汰的株系，后混收當選株系，作為下年原種圃的種源擴大繁殖。
       4.7.3.6 保純
　　授粉結束后，先割保持系，防雜保純。
       4.7.4 原種圃
       4.7.4.1 種子來源
　　上年當選的混優種子，保持系用上季的混優群體或原種。
       4.7.4.2 種植方式
　　嚴格隔離，按父母本播種差期分別播種育秧。行比1∶4或2∶8，母本單本密植，父本插雙株，采取綜合措施增加繁殖系數，進一步去雜去劣，確保原種質量。
       4.7.4.3 定原種
　　授粉結束后先割父本，經田間和室內檢驗、原種比較試驗，符合GB 4404.1原種標準的定為原種。
       4.7.4.4 種子檢驗
　　生產單位要搞好種子檢驗，并由種子檢驗部門根據GB/T 3543.1～3543.7進行復檢，對符合GB 4404.1規定標準的種子簽發合格證書，對不合格的種子，提出處理意見。

       附　錄　A
     （標準的附錄）

       秈型雜交水稻“三系”原種生產田間記載項目與內容
       A1 田間檔案記載
       A1.1 記載土壤質地：氮、磷、鉀有機質含量；底肥、追肥的種類、數量、施肥方法、次數。
       A1.2 記載前作、耕作和水漿管理情況。
       A1.3 主要病蟲害的種類、程度、受害時間、防治情況（農藥品種、用量、方法及效果）。
       A1.4 抗倒性：記載倒伏日期（日/月，下同）和倒伏程度、面積（％）、原因等。
       A2 主要生育期
       A2.1 播種期
　　播種當天的日期。
        A2.2 移栽期
　　實際移栽的日期。
       A2.3 分蘗期
　　50％植株的新生分蘗葉尖露出葉鞘的日期。
       A2.4 孕穗期
　　50％植株的劍葉全部露出下一葉葉枕的日期。
        A2.5 抽穗期
　　分見、始、盛、齊四期，以觀察點的抽穗進度劃分，主穗穗頂露出劍葉葉鞘5％為見穗；10％為始穗；50％為盛穗；80％為齊穗的日期。
        A2.6 成熟期
　　 95％以上谷粒變黃，米質堅硬。成熟期為適宜收割的日期。
        A2.7 收割期
　　實際收割的日期。
        A2.8 全生育期
　　播種第二天至成熟的天數。
        A3 主要形態特征
        A3.1 株型
　　分松散、緊湊、一般等，在分蘗盛期和抽穗期觀察。
        A3.2 株高和植株整齊度
　　量主穗從地面至穗頂（不連芒）的高度，以“cm”表示。植株整齊度分別以整齊（++）、一般（+）、不整齊（-）記載。
        A3.3 主莖葉片數
　　從每片完全葉（芽鞘及不完全葉除外）至劍葉的葉片數（自下而上）記載，定點10株，求其平均值，并統計不同葉片數的株數。每3～5d（天）觀察一次。
       A3.4 葉片長寬度
　　以劍葉長、寬表示，量取葉幅最寬處，求20株的平均值。以“cm”表示。
       A3.5 葉態
　　分挺拔、疲軟、一般，在孕穗期記載。
       A3.6 葉色與葉鞘色
　　葉色分綠、紫、濃、中、淡；葉鞘色分綠、紫、紅。
       A3.7 穗形和粒形
　　穗形分緊密、松散、一般。粒形分細長、長、長圓、短圓等。
       A3.8 穎色和稃尖色
　　穎色分淡黃、深黃、褐、黑褐等。稃尖色分無色、紫色、黃色。在抽穗期觀察。
       A3.9 芒色和有無芒
　　芒色分白紅、紫等；芒分無芒、短芒、長芒。在抽穗時觀察。
       A3.10 千粒重
　　隨機取干谷1000粒稱重，三次重復，求平均值。以“g”表示。
       A3.11 穗長和穗頸長
　　穗長量穗頸節到穗頂（芒除外）的長度。求10株的平均值，以“cm”表示。穗頸長量主穗和分蘗穗各一個的穗頸節至劍葉葉枕的長度，求10株的平均值，用“cm” 表示。
       A3.12 包頸長
　　量10株的主穗和分蘗穗各一個的劍葉葉枕至穗頸節的長度的平均值。以“cm” 表示。
       A3.13 包頸粒數和包頸粒率
　　數10穗包頸內的粒數，求其平均數并計算其占總粒數的百分率。
       A3.14 穗整齊度
　　分整齊、中等、不整齊記載。
       A3.15 穗重
　　測10株主穗、分蘗穗的平均值，以“g”表示。
       A3.16 穗粒數
　　數10株的總粒數、實粒數和空秕粒數的平均值，求結實率、空秕率。
       A3.17 穎花開閉時間
　　以10朵穎花開閉穎所需時間之和的平均值表示，以“h”（小時）計算。
       A3.18 穎花開穎角度
　　用量角器量10個穎花的平均值，穎花開張角分大（90°以上）、中（46°～90°）、小（45°以下）。
       A3.19 花時
　　連續3d（天）定點觀察一穗始花到終花歷時的平均值。
       A3.20 柱頭外露率
　　隨機調查20株主穗的穎花數，數其中單邊外露、雙邊外露數，求其各占調查數的百分數。
       A3.21 花粉類型和鏡檢方法
　　根據敗育花粉的表現形態及對碘-碘化鉀能否染色分為典敗、圓敗、染敗、正常四種。典敗花粉粒形態不規則、透明不染色，圓敗花粉粒圓形透明不染色，染敗花粉圓形不透明或部分透明輕度染色；正常花粉粒圓形不透明染成棕黑色。鏡檢方法：碘-碘化鉀鏡檢，每株鏡檢1個主穗上、中、下3個穎花共18個花藥的玻璃片，用碘化鉀液染色，放大100倍左右看3個標準視野的各類花粉的概數。凡染色花粉較多的植株，要復查一次。
        A3.22 花藥形態
　　分干癟、瘦小、飽滿；色澤分乳白色、金黃色。
       A4 育性
       A4.1 不育株率
　　調查自然隔離區100株的不育株率。
       A4.2 不育度
　　每穗不實粒數占總粒數的百分率（雌性不育者在外）。一般分五個等級：
　　全不育：自交不結實。
　　高不育：自交結實率1％～10％。
　　半不育：自交結實率11％～50％。
　　低不育：自交結實率51％～80％。
　　正常育：自交結實率80％以上。
       A4.3 恢復株率
　　結實株數占調查總株數的百分率。
       A4.4 恢復度
　　每穗結實粒數占每穗總粒數的百分率。以10株主、蘗穗的平均數表示。

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